Gasdermin D（GSDMD）是經(jīng)典和非經(jīng)典炎癥小體共有的關(guān)鍵下游效應(yīng)蛋白。GSDMD被CASP-1,-4,-5和-11裂解后，釋放其N末端結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域在脂質(zhì)膜上形成孔，最終導(dǎo)致細(xì)胞焦亡。

GSDMD (又名 DFNA5L 或 FKSG10 )屬于成孔蛋白家族。人源的成孔蛋白家族家族有 6 個(gè)成員，

而鼠源的成孔蛋白家族有 1 0 個(gè)成員組成，包括GSDMA、GSDMB、GSDMC、GSDMD、GSDME和PJVK 。GSDMD在人體組織和不同的免疫細(xì)胞中廣泛表達(dá)。此胞質(zhì)蛋白具有兩個(gè)不同的結(jié)構(gòu)域，中間由一個(gè)連接區(qū)域分隔。C末端結(jié)構(gòu)域會(huì)通過(guò)與N末端結(jié)構(gòu)域（GSDMD-NT）結(jié)合而發(fā)揮自抑制功能。被激活后的經(jīng)典或非經(jīng)典炎癥小體相關(guān)caspases會(huì)透過(guò)蛋白水解切割GSDMD的連接區(qū)域，從而釋放出GSDMD-NT。這個(gè)功能性結(jié)構(gòu)域會(huì)易位至質(zhì)膜并寡聚化，形成內(nèi)徑約為18 nm的孔。這些膜孔允許可溶性胞質(zhì)物（例如IL-1β和IL-18）以及非特異性離子（例如Na+流入和K+外排）的通過(guò)。

GSDMD孔在質(zhì)膜上的積累會(huì)導(dǎo)致被稱為“細(xì)胞焦亡"的程序性細(xì)胞死亡。這些壞死的促炎性細(xì)胞會(huì)顯示出特征性的形態(tài)變化，例如細(xì)胞腫脹和形成氣泡狀的突出物，最終導(dǎo)致質(zhì)膜破裂。PMR可以將胞內(nèi)大分子釋放出胞外，這些分子包括乳酸脫氫酶（LDH，為PMR的標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記）和HMGB1。

GSDMD孔的形成是一個(gè)高度受控的過(guò)程。的確，避免不當(dāng)或過(guò)度的細(xì)胞焦亡是非常重要，否則會(huì)導(dǎo)致許多病理性炎癥的發(fā)生。在靜止?fàn)顟B(tài)下，GSDMD的表達(dá)一般較低，在啟動(dòng)階段時(shí)，其表達(dá)會(huì)受到轉(zhuǎn)錄調(diào)控。而直到被活化的CASP-1或CASP-11/4/5裂解前，GSDMD會(huì)一直處于自抑制的狀態(tài) 。有趣的是，CASP-8也可以裂解并激活GSDMD，而CASP-3可以通過(guò)將GSDMD-NT裂解為非活性片段，來(lái)限制孔的形成。GSDMD-NT會(huì)優(yōu)先靶向僅存在于質(zhì)膜內(nèi)部小葉中的脂質(zhì)（磷酸肌醇），因此它只能從內(nèi)部介導(dǎo)細(xì)胞死亡的發(fā)生。

盡管GSDMD孔的形成通常會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞焦亡，但有多種細(xì)胞類型（例如巨噬細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞）能夠釋放具生物活性的IL-1β并保持細(xì)胞存活。這些細(xì)胞利用由運(yùn)輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合物(ESCRT)-III機(jī)制介導(dǎo)的膜修復(fù)機(jī)制來(lái)預(yù)防或延遲細(xì)胞焦亡。這種機(jī)制通過(guò)泡吞作用吞噬受損膜來(lái)清除GSDMD孔。目前尚不清楚是否存在其他機(jī)制來(lái)分解或破壞GSDMD孔。

GSDMD已經(jīng)成為一個(gè)具吸引力的藥物靶點(diǎn)，以治療人類各種炎性疾病。其他GSDM家族成員，例如GSDME和GSDMA3，也可能在人類疾病中發(fā)揮作用。未來(lái)如果對(duì)這些蛋白的機(jī)制和調(diào)控有更全面的研究，將有助開發(fā)靶向GSDM的治療劑。

Gasdermin D細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

監(jiān)測(cè)GSDMD依賴性應(yīng)答

THP1-KO-GSDMD Cells& RAW-ASC KO-GSDMD Cells

THP1-KO-GSDMD 和 RAW-ASC KO-GSDMD細(xì)胞分別來(lái)自人源單核細(xì)胞THP-1和鼠源巨噬細(xì)胞RAW 264.7并穩(wěn)定表達(dá)ASC。這些細(xì)胞被敲除來(lái)雙等位基因GSDMD的表達(dá)。它們?cè)冢ɡ缡褂肗igericin刺激的）經(jīng)典炎癥小體和（例如使用胞質(zhì)LPS或OMVs刺激的）非經(jīng)典炎癥小體早期激活階段時(shí)，表現(xiàn)出受損的IL-1β分泌和細(xì)胞焦亡。

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